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Tipo do documento: Dissertação
Título: Efeitos da irradiação com laser de baixa intensidade vermelha e infravermelha na viabilidade e proliferação de células-tronco derivadas da polpa de dentes decíduos humanos (SHED)
Autor: MARQUES, Nelson Pereira 
Primeiro orientador: HANEMANN, João Adolfo Costa
Primeiro coorientador: SAKAI, Vivien Thiemy
Primeiro membro da banca: BRIGAGÃO, Maísa Ribeiro Pereira Lima
Segundo membro da banca: LOURENÇO NETO, Natalino
Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro os efeitos de diferentes densidades de energia do Laser de Baixa Intensidade (LBI) vermelho e infravermelho na viabilidade e proliferação de células-tronco derivadas da polpa de dentes decíduos esfoliados humanos (SHED). As SHED foram mantidas em meio de cultura MEMα suplementado com 10% soro fetal bovino (SFB) e penicilina e estreptomicina 1%. Entre a 10ª e 15ª passagem, as SHED foram irradiadas com laser vermelho (LV - 660 nm) ou laser infravermelho (LIV - 780 nm) programados com as seguintes dosimetrias: a (1,2 J/cm 2 ), b (2,5 J/cm 2 ), c (5,0 J/cm 2 ), d (7,5 J/cm 2 ), C+ (células não irradiadas e cultivadas em condições nutricionais regulares - 10% SFB), C- (células não irradiadas e cultivadas em déficit nutricional - 1% SFB). A viabilidade foi avaliada pelas técnicas MTT e Cristal Violeta (CV), e a proliferação celular através do ensaio SRB, 24, 48 e 72 horas após a irradiação. Os valores obtidos foram analisados pelo método ANOVA a 2 critérios seguido do teste de Tukey com nível de significância de 5%. Nos períodos de 24 e 48 horas, o grupo LVc apresentou significativamente maiores taxas de viabilidade celular do que os grupos LVa, pelo ensaio MTT e LVb pelo ensaio CV. Às 48 horas, LVb também apresentou menor proliferação do que LVc. Comparado à C+, LVb apresentou menor viabilidade às 72 horas e menor proliferação às 24 e 48 horas. LVa, LIVa e LIVc foram menos viáveis às 24 horas, enquanto LVa, LIVb e LIVc revelaram menor capacidade proliferativa às 48 horas. Em relação aos diferentes tipos de laser, LVc favoreceu a viabilidade de SHED em comparação a LIVc às 24 e 48 horas. Os grupos LVa e LVb apresentaram menores taxas de viabilidade celular do que LIVa e LIVb às 48 horas. Neste período, a taxa de proliferação celular de LVb também foi menor do que LIVb. De acordo com os resultados obtidos, a dose 5 J/cm2 aplicada com LV induziu taxas elevadas de viabilidade e proliferação celular, já a irradiação desta dose pelo LIV provocou efeitos negativos. As irradiações com 1,2 J/cm2 e 2,5 J/cm2 causaram danos à atividade metabólica e proliferação de SHED independentemente do tipo de laser, sendo que a redução das taxas de viabilidade e proliferação celular foi maior após aplicação destas doses com LV.
Abstract: The aim of this study was to evaluate the in vitro effects of different energy density of visible and infrared Low-level laser (LLL) on the viability and proliferation of stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED). SHED were maintained in MEMα culture medium supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS) and 1% penicillin and streptomycin. Between the 10th and 15th passages, SHED were irradiated with red laser (I - 660 nm) or infrared laser (II - 780 nm) set with the following dosimetry: a (1.2 J/cm 2 ), b (2.5 J/cm 2 ), c (5.0 J/cm 2 ), d (7.5 J/cm 2 ), C+ (non-irradiated cells, grown under regular nutritional conditions - 10% FBS), C- (non-irradiated cells, grown under nutritional deficit - 1% FBS). Cell viability was assessed by MTT and Crystal Violet (CV) assays, and proliferation through SRB after 24, 48 and 48 h of irradiation. The values were analyzed by two-way ANOVA followed by Tukey test with statistical significance established at 5%. At 24 and 48 h period, group Ic showed significantly higher rates cell viability rates than Ia by MTT, and Ib group through CV assay. At 48 h, Ib also revealed lower proliferation than Ic. Comparing to the C+ group, Ib exhibited lower viability at 72 h, and proliferation at 24 and 48 h. Ia, IIa and IIc groups were less viable at 24 h, while Ia, IIb e IIc revealed lower proliferative capacity at 48 h. Regarding to the different types of laser, Ic enhanced SHED viability in comparison to IIc at 24 and 48 h. Ia e Ib groups showed lower cell viability rates than IIa e IIb at 48 h. In this period, cell proliferation rate of Ib was also lower than IIb. According to the results, 5 J/cm2 applied by red LLL induced high rates of cell viability and proliferation, while the irradiation of this dose for infrared laser led to negative effects. LLL irradiation with 1.2 and 2.5 J/cm2 caused damage to metabolic activity and proliferation of SHED regardless of the type of laser, and the reduction of viability and cell proliferation rates was higher after the application of these doses with red laser.
Palavras-chave: Células-tronco
Proliferação de Células
Aderência Celular
Terapia a Laser de Baixa Intensidade
Área(s) do CNPq: ODONTOLOGIA::CLINICA ODONTOLOGICA
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Universidade Federal de Alfenas
Sigla da instituição: UNIFAL-MG
Departamento: Faculdade de Odontologia
Programa: Programa de Pós-Graduação em Ciências Odontológicas
Citação: MARQUES, Nelson Pereira. Efeitos da irradiação com laser de baixa intensidade vermelha e infravermelha na viabilidade e proliferação de células-tronco derivadas da polpa de dentes decíduos humanos (SHED). 2018. 51 f. Dissertação( Programa de Pós-Graduação em Ciências Odontológicas) - Universidade Federal de Alfenas, Alfenas, MG, 2018.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
Endereço da licença: http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
URI: https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/1152
Data de defesa: 5-Fev-2018
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